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Efecto del tiempo entre el faenado y la aspiración folicular sobre la concentración de esteroides en el líquido folicular, la expresión de los genes MATER y OCT-4, y la competencia de los ovocitos de ganado Bos indicus

Herrera Puerta, Erika Yamile (2014) Efecto del tiempo entre el faenado y la aspiración folicular sobre la concentración de esteroides en el líquido folicular, la expresión de los genes MATER y OCT-4, y la competencia de los ovocitos de ganado Bos indicus. Maestría thesis, Universidad Nacional de Colombia Sede Medellín.

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Resumen

Resumen: La competencia del ovocito es un factor determinante para la producción in vitro de embriones en mamíferos. Se han encontrado múltiples asociaciones a nivel molecular con la capacidad del ovocito para iniciar el desarrollo embrionario; sin embargo, muchos factores permanecen aún sin dilucidar. El ambiente folicular influencia en gran medida las condiciones a nivel molecular y fisiológico del ovocito afectando su capacidad para madurar, ser fertilizado y desarrollarse hasta estadios pre-implantatorios in vivo e in vitro. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto del tiempo transcurrido entre el faenado y la aspiración de los folículos sobre la concentración de hormonas esteroides en el líquido folicular, la expresión de los genes MATER y OCT-4 en el ovocito, la expresión del gen FST en las células de la granulosa y la tasa de blastocistos obtenidos in vitro. Los ovarios fueron separados en dos grupos. El grupo I fue aspirado a las 0.5 horas después del faenado y el grupo II fue almacenado por 4 horas a 30ºC antes de la aspiración folicular. Para evaluar el efecto sobre el perfil endocrino del folículo se midieron las concentraciones de progesterona y estradiol en el líquido folicular de ambos grupos. Para determinar el efecto de los tratamientos sobre la calidad de los ovocitos, una parte de los complejos Cúmulo-Ovocito (CCOs) de cada grupo fue desnudada para evaluar la abundancia relativa de ARNm de los genes MATER y OCT-4 en el ovocito y del gen FST en las células de la granulosa, mientras que la otra fue sometida a maduración, fertilización y cultivo in vitro para evaluar la capacidad de desarrollo hasta blastocito. Para el grupo II (CCOs aspirados 4 horas pos-faenado), la concentración de progesterona disminuyó significativamente (p ≤ 0.05) en comparación con el grupo I (55,12 ± 24,77 y 122,04 ± 48,80 ng/mL respectivamente). Adicionalmente para el grupo II, la abundancia relativa de los transcriptos MATER y OCT-4, las tasas de blastocitos (d7) y blastocitos eclosionados (d9) fueron significativamente mayores en comparación con los CCOs aspirados a las 0.5 horas (p<0.05). La concentración de estradiol en el folículo y la expresión de FST en las células de la granulosa no mostraron diferencias significativas entre los dos grupos. Estos resultados indican que la incubación de los ovarios por 4 horas a 30 ᵒC después del faenado afecta el perfil endocrino del líquido folicular caracterizado por una disminución significativa de la progesterona, mejora la competencia de los ovocitos y aumenta los transcriptos de los genes MATER y OCT-4, lo cual sugiere que estos genes pueden servir como predictores de la calidad del ovocito en bovinos., Abstract: The oocyte competence is a determinant factor for the mammalian in vitro embryo, affecting its capability to mature, being fertilized and developing to pre implantatory stages in vivo and in vitro. The aim of this study was to evaluate the effect of the time lapsed between slaughter and follicular aspiration on steroid hormones concentration in follicular fluid, the expression of genes OCT-4 and MATER in the oocyte, the expression of gene FST in granulose cells and blastocyst rate in vitro. Ovaries were separated into two groups. Group I was aspirated 0.5 hours after slaughter and group II was stored for four hours at 30ºC before follicular aspiration. To evaluate the effect on follicular endocrine profile, progesterone and estradiol concentration were measured in the follicular fluid for both groups. To determine the effect of treatment on oocyte quality, a part of Cumulus-Oocyte Complex (COCs) in both groups were denuded to evaluate the mRNA relative abundance of genes MATER and OCT-4 in the oocyte and gene FST in granulose cells, while the other part of COCs were submitted to in vitro maturation, fertilization and culture in order to evaluate its capability of development to blastocyst stage in vitro. For group II (COCs aspirated 4 hours post-slaughter) the progesterone concentration decreased significantly (p≤0.05) compare to group I (55,12 ± 24,77 and 122, 04 ± 48,80 ng/mL respectively). Additionally for the production. There are several molecular associations regarding the oocyte capability to initiate embryo development. However, many factors remain no elucidated. Follicular environment greatly influences molecular and physiological conditions in the oocyteoocytes of group II, the relative abundance of the transcripts MATER and OCT-4, the blastocyst rate (d7) and hatched blastocyst rate (d9) were highest than COCs aspirated 0.5 hours after slaughter (p<0.05). Estradiol concentration in the follicle and FST expression in granulose cells showed no differences within groups. These results indicate that incubation of the ovaries for 4 hours at 30 ᵒ C after collected in a slaughterhouse affects the endocrine profile of the follicular XI fluid characterized by a decrease in progesterone, enhances the oocyte competence and increases of transcripts of MATER and OCT-4 genes, suggesting that these genes may serve as predictors of oocyte quality in cattle.

Tipo de documento:Tesis/trabajos de grado - Thesis (Maestría)
Colaborador / Asesor:Urrego Alvarez, Rodrigo Antonio and Camargo Rodriguez, Delmis Omar
Información adicional:Maestría en Biotecnología
Palabras clave:Bovino, Competencia del ovocitoOocyto, Calidad embrionaria, Calidad embrionaria, Progesterona, MATER, OCT-4, Bovine, Oocyte competence, Embryo quality, Progesterone
Temática:5 Ciencias naturales y matemáticas / Science > 57 Ciencias de la vida; Biología / Life sciences; biology
Unidad administrativa:Sede Medellín > Facultad de Ciencias > Escuela de Biociencias
Código ID:39528
Enviado por : Erika Yamile Herrera Puerta
Enviado el día :22 Julio 2014 14:14
Ultima modificación:22 Julio 2014 14:14
Ultima modificación:22 Julio 2014 14:14
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