Escudo de la República de Colombia
Sistema Nacional de Biliotecas - Repositorio Institucional Universidad Nacional de Colombia Biblioteca Digital - Repositorio Institucional UN Sistema Nacional de Bibliotecas UN

Clonación y expresión en escherichia coli de genes de celulasas de clostridium ibun 22a

Vargas Pabón, Lucy Carolina and Montoya, Dolly and Aristizábal, Fabio (2011) Clonación y expresión en escherichia coli de genes de celulasas de clostridium ibun 22a. Revista Colombiana de Biotecnología; Vol. 4, núm. 1 (2002); 29-35 1909-8758 0123-3475 .

Texto completo

[img]
Vista previa
PDF
195kB

URL oficial: http://revistas.unal.edu.co/index.php/biotecnologi...

Resumen

El propósito de este trabajo fue construir una librería genómica a partir de la cepa nativa Clostridium IBUN 22A, utilizando como vector de clonación el plásmido pBluescrip® IIKS+/- y su expresión en Escherichia coli. La detec-ción de ocho clones recombinantes con actividad enzimática se realizó empleando el tamizaje enzimático con tres sustratos: celobiosa, carboximetilcelulosa y celulosa pulverizada (nativa). Los halos de hidrólisis fueron detectados por la técnica de rojo congo. Se realizaron análisis por restricción de tres de los plásmidos recombinantes represen-tativos de cada una de las actividades hidrolíticas, sobre los tres sustratos mencionados. Los tamaños de los insertos clonados fueron aproximadamente 1.600,13.000 y 11.000 pb para pBS68, pBS25 y pBS57, respectivamente. Mayores estudios de expresión proteica y caracterización enzimática permitirán definir la especificidad y otros parámetros característicos de estas enzimas. Así mismo, la secuencia de los insertos hará posible analizar y definir con más detalle la potencialidad biotecnología de nuestra cepa hacia la producción de solventes mediante el empleo de sustratos celulósicos como fuente de carbono para la fermentación acetona, butanol, etanol (ABE)., Genomic library of the native strain Clostridium IBUN 22A was constructed, using plasmid pBluescriptlI® KS+/ - as cloning vector and its expression in Escherichia coli was evaluated. Eight recombination clones with enzymatic activity were detected by enzymatic screening and using the red-Congo test with three substrates: cellobiose, carboxymethyl cellulose (CMC) and cellulose powder (native). Restriction analysis of three recombination plasmids, representative of each enzymatic activity showed the inserted size (1600, 13000 and 11000bp approximately for pBS68, pBS25 and pBS57 respectively). More studies of protein expression and enzymatic characterization will allow theses enzymes and other typical parameters to be defined. In the same way the fragment sequence cloned will lead to a more detailed analysis and definition of the biotechnological potential of this strain regarding solvent production using cellulosic substrates for fermentation.

Tipo de documento:Artículo - Article
Palabras clave:Genomic Library, Cellobiohydrolases, Cellulose, Cellulases, Clostridium, Librería genómica, celobiohidrolasas, celulosa, celulasas, Clostridium solventogénicos
Unidad administrativa:Revistas electrónicas UN > Revista Colombiana de Biotecnología
Código ID:31019
Enviado por : Dirección Nacional de Bibliotecas STECNICO
Enviado el día :30 Junio 2014 15:02
Ultima modificación:18 Agosto 2014 19:16
Ultima modificación:18 Agosto 2014 19:16
Exportar:Clic aquí
Estadísticas:Clic aquí
Compartir:

Solamente administradores del repositorio: página de control del ítem

Vicerrectoría de Investigación: Número uno en investigación
Indexado por:
Indexado por Scholar Google WorldCat DRIVER Registry of Open Access Repositories OpenDOAR Metabiblioteca BDCOL OAIster Red de repositorios latinoamericanos DSpace BASE Open archives La referencia Colombiae Open Access Theses and Dissertations Tesis latinoamericanas CLACSO
Este sitio web se ve mejor en Firefox